13c testul cu urează: preparare, rezultate, pozitiv, negativ

De la descoperirea bacteriei Helicobacter pylori asociată cu gastrita cronică și ulcerele gastrice și duodenale, au fost dezvoltate metode de diagnostic, inclusiv testul cu urează, care permite detectarea acestor microorganisme la un pacient specific, confirmarea implicării lor în dezvoltarea bolilor gastrointestinale și prescrierea unui tratament eficient.

Enzima urează ca biomarker al infecției cu Helicobacter

Bacteriile H. pylori se protejează de mediul acid din lumenul stomacului în două moduri. În primul rând, prin deteriorarea membranei mucoase cu flagelii lor, microorganismele ajung în straturile inferioare ale acesteia, chiar până la celulele epiteliale, unde pH-ul este mai mare (adică aciditatea este mai mică). În al doilea rând, bacteriile neutralizează acidul prin sintetizarea unor cantități mari de urează sau amidohidrolază ureică, o metaloenzimă cu moleculă mare și activitate catalitică.

Utilizarea ureazei în diagnosticul Helicobacter este posibilă nu numai datorită activității citoplasmatice a acestei enzime, ci și a interacțiunii externe cu celulele gazdă.

Sub acțiunea ureezei, are loc descompunerea ureei gastrice în nitrură de hidrogen (amoniac) și dioxid de carbon (dioxid de carbon). Acestea reacționează cu acidul clorhidric din sucul gastric și asigură o zonă de aciditate neutră în jurul H. pylori și, de asemenea, susțin metabolismul celulelor bacteriene.

De aceea, ureaza este cel mai important factor în colonizarea H. pylori în mucoasa gastrică umană, iar detectarea activității ureolitice este considerată un biomarker al virulenței acestei bacterii, pe care gastroenterologii – prin efectuarea unui test cu urează – îl utilizează pentru a diagnostica infecția cu Helicobacter, precum și pentru a monitoriza rezultatele distrugerii (eradicării) bacteriilor induse de medicamente.

Diagnosticul pentru H. pylori include teste invazive și neinvazive – în funcție de necesitatea sau nu a examinării endoscopice a stomacului (fibrogastroduodenoscopie). Testul invaziv este testul rapid de urează sau testul expres de urează (testul RUT), care necesită obținerea de probe de țesut (biopsie). Testul respirator cu uree 13C (13C-UBT) este cel mai frecvent test neinvaziv.

Trebuie menționat că diagnosticul neinvaziv al H. pylori poate fi efectuat folosind un test de sânge pentru anticorpi (specificitate de 75%, sensibilitate - 84%), test ELISA de urină (cu o sensibilitate de 96% și o specificitate de 79%) și un coprogram pentru antigene bacteriene. Mai multe informații - Infecția cu Helicobacter pylori: anticorpi împotriva Helicobacter pylori în sânge

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Indicații pentru procedură test urează

Colonizarea mucoasei gastrice de către H. pylori nu este în sine o boală; este un factor de creștere a încărcăturii bacteriene în organism, care, în anumite condiții, poate declanșa dezvoltarea unui număr de patologii ale stomacului și ale tractului gastrointestinal superior.

Indicațiile pentru diagnosticul infecției cu Helicobacter, în special testul cu urează, sunt asociate cu gastrită cu aciditate crescută, gastrită antrală și atrofică, duodenită, ulcer gastric și ulcer duodenal, limfom MALT gastric. După rezecția endoscopică a cancerului gastric în stadiu incipient, se poate efectua un examen histologic în combinație cu un test rapid cu urează - FGDS cu test cu urează.

Gastroenterologii pot prescrie un test de urează dacă pacienții se plâng de o senzație de greutate și disconfort în regiunea epigastrică, arsuri la stomac frecvente după masă, eructații acre sau putrede, amărăciune în gură, greață, tulburări intestinale, dureri sau crampe în stomac.

[ 8 ], [ 9 ]

Preparare

Pregătirea pentru testul respirator cu uree 13C constă în oprirea de către pacient a: administrării antibioticelor cu 4 săptămâni înainte de test și a AINS, inhibitorilor pompei de protoni (care reduc aciditatea stomacală) și antiacidelor sau adsorbenților utilizați pentru arsuri la stomac - cu cel puțin două săptămâni înainte. Administrarea oricăror medicamente trebuie întreruptă cu cinci până la șase zile, iar consumul de alcool și fumatul - cu trei zile înainte de test.

De asemenea, se recomandă evitarea consumului de leguminoase timp de aproximativ o săptămână înainte de testare, deoarece fasolea, mazărea, lintea, soia și boabele de fasole conțin urează (care protejează plantele de boli și insecte dăunătoare).

În seara dinaintea testului, o cină copioasă târzie este contraindicată; în ziua testării, trebuie să efectuați o igienă orală normală, iar cu o oră și jumătate înainte de test, nu trebuie să beți nimic și să nu folosiți gumă de mestecat.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Tehnică test urează

Tehnica de implementare:

• Mai întâi, se ia o probă respiratorie de bază - o expirație se face într-un recipient din plastic moale (și se închide ermetic);
• lichid cu adaos de 13C-uree se administrează oral;
• După 25-30 de minute, o a doua probă de aer expirat este prelevată într-un alt recipient.

Probele obținute în acest mod sunt analizate pe un spectrometru de masă cu separarea izotopilor într-o a doua probă și determinarea concentrației acestora. Diferența dintre valorile din a doua și prima probă este exprimată ca delta (δ) față de nivelul inițial. Valorile normale, adică valorile negative ale atomului marcat 13C la pacienții neinfectați, variază de la 0,15-0,46%, iar valorile pozitive în prezența infecției sunt de 1,2-9,5%, cu o rată de hidroliză a ureei mai mare de 12-14 μg/min.

Simplu spus: detectarea dioxidului de carbon marcat cu 13C în aerul expirat indică faptul că ureea a fost hidrolizată de enzima urează H. pylori, ceea ce, de fapt, confirmă prezența sa în stomac.

Testul respirator pentru H. pylori

Testul 13C-UBT sau testul respirator cu uree 13C pentru Helicobacter pylori este una dintre cele mai importante metode neinvazive pentru detectarea acestei infecții: cu o sensibilitate de 100% și o specificitate de 98%, riscul de rezultate fals pozitive și fals negative, comparativ cu histologia și testarea anticorpilor din sânge, este cu 2,3% mai mic.

Analiza se bazează pe hidroliza ureei lichide administrate oral, marcate cu un atom de carbon (izotop stabil neradioactiv) 13C (50-75 mg 13C-uree diluată în 100 ml de lichid) de către ureaza H. pylori.

Ureea marcată cu un indicator izotopic suferă hidroliză în stomac cu eliberarea de amoniac și dioxid de carbon care conțin atomi marcați, care difuzează în sânge și sunt excretați din plămâni în timpul respirației. Dioxidul de carbon marcat este înregistrat de un dispozitiv analitic - un spectrometru de masă, a cărui funcționare se bazează pe spectroscopie selectivă izotopică nedispersivă, sau un analizor spectroscopic în infraroșu.

Test rapid de urează

Testul rapid cu ureaze (RUT) se efectuează în timpul examinării endoscopice a stomacului și duodenului - folosind endofibroscoape moderne - și recoltării simultane de probe bioptice. Biomaterialul trebuie prelevat din partea antrală a stomacului. Prin urmare, fibrogastroduodenoscopia sau FGDS cu test cu ureaze este o metodă de diagnostic invazivă.

Biopsia obținută este complet imersată într-un mediu standardizat preparat care conține gel de agar, uree, indicator acido-bazic fenolsulfoftaleină și un agent bacteriostatic (adăugat pentru a preveni creșterea microorganismelor contaminante și rezultatele fals pozitive).

Dacă bacteria H. pylori este prezentă în proba de țesut stomacal, ureaza pe care o produce va hidroliza ureea și va crește pH-ul, ceea ce este clar vizibil atunci când indicatorul se schimbă de la galben la portocaliu (la pH 6,8) și violet (la pH > 8). 75% din testele pozitive își schimbă culoarea în decurs de 120-180 de minute, iar cu cât indicatorul își schimbă culoarea mai repede, cu atât este mai mare numărul de bacterii. Însă testele care par negative sunt păstrate timp de 24 de ore.

Test rapid de urează pozitiv, ce înseamnă? Un test RUT pozitiv – indicatorul se înroșește – înseamnă că proba de biopsie plasată în mediul de agar conține cel puțin 105 bacterii H. pylori, deși concentrația acestora este de obicei mai mare.

Sensibilitatea diferitelor modificări ale testelor variază în intervalul 90-98%, iar specificitatea – 97-99%.

După cum au menționat gastroenterologii, dacă rezultatul pacientului indică un test de urează puternic pozitiv (trei cruci), aceasta înseamnă: pH > 8, iar indicatorul și-a schimbat culoarea în mai puțin de 60 de minute din momentul imersiunii biopsiei, ceea ce indică un număr mare de H.pylori și un nivel ridicat de expresie a ureazăzei. Numărul aproximativ de bacterii poate fi numărat în timpul examinării histologice a biopsiei la microscop, iar dacă depășește 40-50 în zona vizualizată, nivelul de infecție este considerat ridicat.

Testul respirator cu uree 13C dă rareori rezultate fals pozitive, iar la pacienții cu suspiciune de ulcer gastric sau duodenal, un test pozitiv este considerat a confirma diagnosticul, în timp ce un rezultat negativ trebuie confirmat prin EGD cu test cu uree.