Examinarea microbiologică a sputei

Examenul microbiologic este cea mai importantă verigă în căutarea și verificarea diagnostică a agentului cauzal al pneumoniei. Aceasta implică nu numai izolarea agentului cauzal, ci și studierea proprietăților acestuia, inclusiv sensibilitatea la diverse medicamente cu acțiune bactericidă și bacteriostatică.

În acest scop, se utilizează metoda de însămânțare a sputei pe diverse medii nutritive. Într-o probă de spută livrată la laborator, se selectează bulgări purulenți și se spală cu grijă într-o placă Petri cu o soluție izotopică de clorură de sodiu, care permite într-o oarecare măsură eliberarea lor de microflora tractului respirator superior. Semănarea bulgărilor purulenți de spută se efectuează pe diverse medii nutritive, a căror compoziție este descrisă în manuale speciale de microbiologie. Mediile cu însămânțare sunt incubate la 37,5°C timp de 24 de ore. Culturile pure sunt izolate din coloniile crescute, acestea sunt identificate prin metode microbiologice cunoscute și se determină sensibilitatea lor la antibiotice.

Pentru a determina conținutul cantitativ de microorganisme, sputa se omogenizează, se amestecă cu bulion nutritiv, iar din amestec se prepară diluții succesive de zece ori, care se inoculează pe plăci Petri cu agar-sânge. După 24 de ore de incubare la 37,5°C, se iau în considerare rezultatele, numărând coloniile de același tip ca aspect și ținând cont de gradul de diluție al materialului. Din colonii se prepară frotiuri și se examinează la microscop.

Interpretarea rezultatelor

Interpretarea rezultatelor examenului microbiologic al sputei este destul de complexă, ceea ce se explică printr-o serie de factori. Mai sus s-a menționat deja despre însămânțarea constantă a conținutului bronșic cu microflora tractului respirator superior și a cavității bucale și prezența frecventă în conținutul traheobronșic normal al persoanelor sănătoase a majorității agenților cauzatori tipici ai bolilor respiratorii (pneumococi, streptococi, stafilococi etc.). În acest sens, izolarea în spută în timpul studiilor microbiologice a unei asocieri de diverse microorganisme, majoritatea în acest caz fiind oportuniste, face extrem de dificilă stabilirea agentului cauzal al bolii. Prin urmare, pentru interpretarea rezultatelor examenului microbiologic al sputei, este necesar să se țină cont de predominanța cantitativă a unui anumit tip de bacterii (mai mult de 10⁶ ^- 10⁷ ^mc /ml), apariția anumitor microorganisme în faza de exacerbare și dispariția lor în perioada de remisie. Este foarte important să se țină cont de tabloul clinic al bolii.

Principalii și posibilii agenți cauzali ai diferitelor forme clinice de pneumonie

Forma clinică a pneumoniei	Principalii agenți patogeni	Posibili agenți patogeni
Croupous	Pneumococi	Streptococi, Klebsiella
Post-gripă	Stafilococi, pneumococi, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptococi
Abces	Stafilococi, bacterioizi, floră mixtă	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspiraţie	Bacteroide, streptococi anaerobi	Stafilococi, pneumococi
Postoperator	Stafilococi	Pneumococi, Klebsiella
Interstițial	Micoplasme	Agenți patogeni ai ornitozei, psitacozei
Pneumonie secundară la pacienții spitalizați fără terapie antibacteriană anterioară	Stafilococi, pneumococi, klebsiella, bacterioizi	Escherichia coli, serratia etc.
Pneumonia secundară dezvoltată pe fondul terapiei antibacteriene	Microorganisme patogene facultative	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus etc.
La pacienții cu bronșită cronică	Pneumococi, Haemophilus influenzae	Stafilococi, streptococi
La pacienții cu alcoolism	Pneumococi, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoare
În sindromul imunodeficienței dobândite	Pneumocystis, ciuperci	Citomegalovirusuri
La pacienții a căror îngrijire este asigurată de persoane din afara companiei	Pneumococi, stafilococi, papilă hemofilică	Klebsiella, Escherichia coli

Atunci când se evaluează cantitativ rezultatele studiului contaminării microbiene la pacienții cu pneumonie, este necesar să se țină cont de sensibilitatea extrem de mare a acestui indicator la prescrierea antibioticelor. Chiar și tratamentul pe termen scurt cu medicamente antibacteriene poate duce la o scădere bruscă a contaminării microbiene, ceea ce nu permite o evaluare adecvată a rezultatelor studiului sputei. Prin urmare, este recomandabil să se recolteze spută înainte de prescrierea tratamentului cu antibiotice.

De asemenea, trebuie menționat că pentru cultivarea agenților patogeni intracelulari ai pneumoniei (Mycoplasma, Legionella, Chlamydia, Rickettsia) se utilizează medii nutritive selective speciale. Testarea microbiologică de rutină folosind medii nutritive convenționale (agar-agar) nu dă niciodată rezultate pozitive. Prin urmare, alegerea metodelor specifice de testare microbiologică trebuie efectuată cu participarea medicului curant, care este obligat să informeze medicul de laborator despre suspiciunile sale cu privire la posibilul rol al agenților patogeni intracelulari în apariția pneumoniei la acest pacient.

Trebuie adăugat că, în practica clinică reală, chiar și o examinare microbiologică perfectă din punct de vedere tehnic a sputei permite identificarea agentului patogen în cel mult 40-60% din cazuri. Prin urmare, se pot utiliza alte metode moderne de cercetare pentru verificarea agentului patogen. Conținutul informațional al unui studiu bacteriologic poate fi crescut semnificativ prin utilizarea aspiratului traheobronșic, a lichidului obținut în timpul lavajului bronhoalveolar (BAL), bronhoscopiei etc., în loc de spută, ca material biologic studiat.

În plus, metoda imunofluorescenței diferitelor materiale biologice (material de bronhoscopie, sânge, conținut pleural etc.), metodele de diagnostic PCR și studiul nivelului de anticorpi specifici din serul sanguin pot fi utilizate pentru identificarea agenților patogeni ai pneumoniei. Din păcate, aceste metode de diagnostic nu au găsit încă o aplicare clinică largă și sunt utilizate în prezent doar în centre și laboratoare specializate mari.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]