Diagnosticul bolii granulomatoase cronice

Diagnosticare

Diagnosticul bolii granulomatoase cronice se bazează pe evaluarea activității funcționale a fagocitelor. Se utilizează următoarele teste:

1. Testul de reducere cu nitroblue tetrazoliu (testul NBT). În mod normal, când fagocitele absorb colorantul galben nitroblue tetrazoliu (NBT), activitatea lor metabolică crește, în timp ce NBT este oxidat, iar produșii acestei reacții sunt colorați în albastru. Dacă metabolismul fagocitelor este perturbat, intensitatea colorației albastre scade.
2. Chemiluminescența neutrofilelor. Oxidarea substratului este însoțită de emisie de lumină ultravioletă sau fluorescență, intensitatea emisiei putând fi utilizată pentru a evalua activitatea funcțională a fagocitelor.
3. Evaluarea activității fagocitare: capacitatea fagocitelor de a distruge bacteriile catalază-pozitive in vitro.
4. Examinarea genetică a pacienților și a familiilor acestora la detectarea tulburărilor activității funcționale a fagocitelor.

Definiția tipurilor și subtipurilor de boală granulomatoasă cronică

Imunoblotarea cu anticorpi împotriva tuturor celor patru componente ale NADPH oxidazei este frecvent utilizată pentru a diferenția tipurile și subtipurile de boli granulomatoase cronice. Dacă una dintre componentele citosolice (p47 ^phax sau p67 ^phax ) lipsește din blot, aceasta indică o mutație în gena corespunzătoare, în timp ce dacă una dintre componentele membranare (gр91 ^phax sau p22 ^phax ) lipsește, cealaltă nu este detectată, deoarece subunitățile se stabilizează reciproc pentru maturare și exprimare completă. Unii cercetători utilizează citoflowmetria cu anticorpi anti-citocrom p558 pentru a detecta gp91 ^phax /p22 ^phax pe suprafața neutrofilelor. În cele din urmă, diagnosticul este confirmat prin identificarea unei mutații în gena corespunzătoare.

Diagnosticul prenatal al bolii granulomatoase cronice

Înainte ca tehnologiile genetice moleculare să devină disponibile, diagnosticul prenatal al bolii granulomatoase cronice se efectua prin măsurarea activității NADPH oxidazei din neutrofilele fetale și prin colectarea de sânge din cordonul ombilical prin fetoscopie la 16-18 săptămâni de gestație. Analiza ADN-ului celulelor din lichidul amniotic sau a vilozităților corionice se efectuează acum pentru a căuta defecte genetice specifice folosind Southern blot, reacția în lanț a polimerazei și polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție, care este mai fiabil și permite stabilirea diagnosticului mai devreme în timpul sarcinii.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]