Teste de susceptibilitate la antibiotice: pregătire, descifrare, cât de mult se face

Astăzi, testarea sensibilității la antibiotice devine din ce în ce mai populară. Microflora umană este destul de diversă, reprezentată de un număr mare de microorganisme în diverse biotopi.

Companiile farmaceutice au dezvoltat un număr mare de agenți antibacterieni, antibiotice, care ajută la menținerea unui raport și a unui număr normal al populațiilor microbiene. Odată cu debutul erei antibioticelor, multe boli considerate anterior fatale au fost vindecate. Dar și microorganismele se străduiesc să supraviețuiască, adaptându-se treptat la acțiunea medicamentelor antibacteriene. De-a lungul timpului, multe dintre ele au dobândit rezistență la multe medicamente, au fixat-o în genotip și au început să o transmită din generație în generație. Astfel, noile microorganisme sunt inițial insensibile la anumite medicamente, iar utilizarea lor poate fi ineficientă. Farmaciștii dezvoltă din ce în ce mai multe produse noi, adăugându-le noi componente active, schimbând formula de bază. Dar, treptat, se dezvoltă și rezistență la acestea.

Motivul rezistenței crescute a microflorei la multe medicamente, și chiar la analogii acestora, este adesea ascuns în utilizarea incorectă și necontrolată a antibioticelor. Medicii prescriu antibiotice și combinații ale acestora pentru diverse boli bacteriene. În același timp, nu există o evaluare preliminară a eficienței acestora, nu este selectată doza optimă, ceea ce este foarte important atât pentru tratament, cât și pentru prevenirea mecanismelor de dezvoltare a rezistenței ulterioare. Mulți oameni prescriu în mod eronat terapie antibacteriană chiar și pentru boli virale, ceea ce este ineficient, deoarece antibioticul nu acționează împotriva virusurilor.

Terapia este adesea prescrisă fără teste preliminare de sensibilitate, nefiind efectuată selecția agentului activ și a dozei necesare pentru fiecare boală și biotop specific. Deoarece antibioticele sunt prescrise „orbește”, există adesea cazuri în care acestea nu prezintă nicio activitate împotriva microorganismelor care au cauzat boala și al căror număr trebuie redus. În schimb, acestea afectează alți reprezentanți ai microflorei, rezultând disbacterioză, care este, de asemenea, o patologie destul de periculoasă și poate duce la consecințe grave. Deosebit de periculoase sunt cazurile în care un antibiotic distruge microflora normală, care este concepută pentru a proteja organismul și a-i menține funcționarea normală. Există, de asemenea, cazuri în care se prescrie prea mult sau prea puțin medicament.

Pacienții sunt, de asemenea, iresponsabili în ceea ce privește tratamentul. Adesea, tratamentul este oprit după ce simptomele bolii au încetat să mai deranjeze. În același timp, mulți preferă să nu finalizeze întregul tratament. Acesta este unul dintre factorii care contribuie la dezvoltarea rezistenței la bacterii. Cura completă este concepută pentru a ucide complet microflora patogenă. Dacă tratamentul nu este finalizat, aceasta nu este complet ucisă. Microorganismele care supraviețuiesc suferă mutații, dezvoltă mecanisme care le oferă protecție împotriva acestui medicament și o transmit generațiilor următoare. Pericolul este că rezistența se dezvoltă nu numai în raport cu acest medicament specific, ci și cu întregul grup de medicamente.

Prin urmare, astăzi, unul dintre cele mai eficiente mijloace de terapie rațională și prevenire a rezistenței este determinarea preliminară a sensibilității la medicamentul prescris și selectarea dozei optime a acestuia.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Indicații pentru procedură teste de sensibilitate la antibiotice

În mod normal, o astfel de analiză ar trebui efectuată în toate cazurile în care este necesară terapia antibacteriană. Pe baza legilor de bază ale terapiei cu antibiotice, orice antibiotic poate fi prescris numai după ce s-a efectuat o evaluare preliminară a sensibilității microflorei la acest agent și s-a determinat concentrația optimă a substanței active în condiții de laborator. În practică, din diverse motive și circumstanțe, un astfel de studiu nu se efectuează înainte de începerea tratamentului, iar medicul este obligat să selecteze un medicament „la întâmplare”.

Astăzi, testarea sensibilității se efectuează doar în cazurile în care medicul are îndoieli serioase cu privire la eficacitatea medicamentului prescris, în cazurile de lipsă prelungită de efect a medicamentului și, de asemenea, atunci când se utilizează același medicament în mod repetat într-o perioadă limitată de timp. Sensibilitatea este adesea determinată în tratamentul bolilor cu transmitere sexuală. Mulți specialiști apelează la analiză în cazul efectelor secundare, al reacțiilor alergice și când este necesară înlocuirea unui medicament cu altul.

Analiza este adesea utilizată și pentru selectarea medicamentelor pentru terapia antibacteriană în perioada de recuperare după operații, intervenții laparoscopice și prelevarea de organe. În departamentele de chirurgie și chirurgie purulentă, un astfel de studiu este pur și simplu necesar, deoarece rezistența se dezvoltă aici destul de rapid. În plus, se dezvoltă cele super-rezistente „dobândite în spital”. Multe clinici private abordează prescrierea medicamentelor cu întreaga responsabilitate - numai după verificarea sensibilității. În multe cazuri, bugetul instituțiilor de stat pur și simplu nu permite efectuarea unor astfel de studii pentru fiecare pacient care necesită terapie antibacteriană.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Preparare

Pregătirea pentru studiu nu necesită măsuri speciale. Este aceeași ca și pentru orice teste. Cu câteva zile înainte de studiu, trebuie să vă abțineți de la consumul de alcool. Dimineața, în ziua recoltării materialului, în majoritatea cazurilor, nu puteți mânca sau bea. Dar totul depinde de tipul de analiză. Materialul pentru studiu poate fi diferit, în funcție de boală.

În cazul afecțiunilor gâtului și ale tractului respirator, se recoltează un tampon din gât și nas. În venerologie, ginecologie, urologie, se recoltează tamponuri genitale și sânge pentru analiză. În bolile renale, urina este adesea necesară. În cazul bolilor gastrointestinale și al unor boli infecțioase, se examinează fecalele și vărsăturile. Uneori se poate examina laptele matern, secrețiile nazale, secrețiile oculare, saliva și sputa. În cazul patologiilor severe și al suspiciunii unui proces infecțios, se examinează chiar și lichidul cefalorahidian. Spectrul este destul de larg.

Caracteristicile recoltării materialului sunt determinate de afilierea sa biologică. Astfel, urina și fecalele se colectează dimineața într-un recipient curat sau într-un recipient special pentru material biologic. Laptele matern se colectează înainte de hrănire. Porțiunea din mijloc se ia pentru examinare. Frotiul se recoltează folosind un tampon special, care se trece de-a lungul membranelor mucoase, apoi se introduce într-o eprubetă cu un mediu preparat. Sângele se recoltează într-o eprubetă, dintr-un deget sau o venă. Atunci când se recoltează frotiuri din uretră sau vagin, se recomandă abținerea de la actul sexual timp de câteva zile.

Atunci când se colectează material biologic pentru cercetare, este necesar în primul rând să se asigure colectarea corectă și sterilitatea. Dar, în majoritatea cazurilor, aceasta este preocuparea personalului medical, pacientul nu ar trebui să-și facă griji în această privință. Cel mai adesea, ginecologii și urologii apelează la astfel de studii, pe locul doi - otorinolaringologii în tratamentul bolilor nazofaringelui și faringelui, ale tractului respirator superior.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Tehnică teste de sensibilitate la antibiotice

Materialul biologic colectat este livrat la laborator în condiții sterile, unde se efectuează cercetări suplimentare. În primul rând, se efectuează însămânțarea sa primară pe medii nutritive universale. O parte din material este, de asemenea, prelevată pentru examinare microscopică. Se prepară un frotiu pentru microscopie, se efectuează un studiu, cu ajutorul căruia se poate determina o imagine aproximativă, pentru a presupune ce microorganisme sunt prezente în probă. Acest lucru face posibilă selectarea celor mai optime medii pentru cercetări ulterioare și identificarea microorganismelor. De asemenea, la microscopie se pot observa semne care indică inflamație, un proces oncologic.

Pe parcursul a câteva zile, coloniile de microorganisme cresc într-o placă Petri. Apoi, mai multe colonii sunt prelevate și transferate în medii nutritive selective, care permit determinarea unui grup aproximativ de microorganisme. Acestea sunt incubate timp de câteva zile într-un termostat, iar apoi începe identificarea (determinarea tipului de microorganism). Identificarea se efectuează folosind teste biochimice și genetice speciale, identificatori. În plus, se pot efectua studii imunologice.

După ce agentul patogen principal a fost izolat, se evaluează sensibilitatea acestuia la antibiotice. Există mai multe metode pentru aceasta. Cea mai frecvent utilizată metodă este diluția serială sau metoda difuziei pe disc. Metodele sunt descrise în detaliu în cărțile de referință microbiologice, ghiduri și standarde de laborator.

Esența metodei de difuzie cu disc constă în însămânțarea microorganismelor identificate pe un mediu nutritiv, iar deasupra se așează discuri speciale îmbibate cu antibiotice. Semințele sunt incubate într-un termostat timp de câteva zile, apoi se măsoară rezultatele. Se evaluează gradul de inhibare a creșterii bacteriene de către fiecare antibiotic. Dacă bacteria este sensibilă la antibiotic, în jurul discului se formează o „zonă de liză”, în care bacteriile nu se reproduc. Creșterea lor este lentă sau complet absentă. Diametrul zonei de inhibare a creșterii este utilizat pentru a determina gradul de sensibilitate a microorganismelor la antibiotic și pentru a formula recomandări suplimentare.

Metoda de diluție serială este cea mai precisă. Pentru aceasta, microorganismele sunt însămânțate pe medii nutritive lichide, se adaugă un antibiotic diluat conform sistemului de diluție zecimală. După aceasta, eprubetele sunt plasate într-un termostat pentru incubare timp de câteva zile. Sensibilitatea la antibiotice este determinată de gradul de creștere bacteriană într-un bulion nutritiv cu adăugarea de antibiotice. Se înregistrează concentrația minimă la care microorganismele încă cresc. Aceasta este doza minimă a medicamentului (este necesară recalcularea de la unități microbiologice la substanța activă).

Acestea sunt metode microbiologice standard care stau la baza oricărei cercetări. Ele implică executarea manuală a tuturor manipulărilor. Astăzi, multe laboratoare sunt dotate cu echipamente speciale care efectuează toate aceste proceduri automat. Un specialist care lucrează cu astfel de echipamente are nevoie doar de capacitatea de a lucra cu echipamentul, respectarea regulilor de siguranță și sterilitate.

Este necesar să se țină cont de faptul că indicii de sensibilitate în condiții de laborator și în organismele vii diferă puternic. Prin urmare, unei persoane i se prescrie o doză mai mare decât cea determinată în timpul studiului. Acest lucru se datorează faptului că organismul nu are condiții optime pentru creșterea bacteriilor. În laborator, se creează „condiții ideale”. O parte din medicament poate fi neutralizată prin acțiunea salivei, a sucului gastric. O parte este neutralizată în sânge de anticorpii și antitoxinele produse de sistemul imunitar.

Test de sensibilitate la antibiotice în urină

Mai întâi, se recoltează material biologic. Pentru a face acest lucru, trebuie să colectați porțiunea din mijloc a urinei de dimineață și să o duceți la laborator. Este important să mențineți sterilitatea și să nu luați antibiotice cu câteva zile înainte de analiză, altfel puteți obține un rezultat fals negativ. După aceasta, se efectuează o însămânțare standard, a cărei esență este de a izola o cultură pură a agentului patogen și de a selecta un antibiotic care va avea un efect bactericid optim asupra acestuia. Se determină concentrația necesară de antibiotic.

Analiza urinei este cel mai adesea prescrisă atunci când există suspiciunea unui proces infecțios și inflamator în sistemul genitourinar, cu imunodeficiențe și tulburări metabolice. În mod normal, urina este un lichid steril. Durata unui astfel de studiu este de 1-10 zile și este determinată de rata de creștere a microorganismului.

Cultură și testare a sensibilității la antibiotice

Studiul implică izolarea microorganismului patogen într-o cultură pură. Uneori pot exista mai multe astfel de microorganisme (infecție mixtă). Unele microorganisme sunt capabile să formeze biofilme, care sunt un fel de „comunități microbiene”. Rata de supraviețuire a biofilmelor este mult mai mare decât cea a microorganismelor individuale sau a asociațiilor. În plus, nu toate antibioticele sunt capabile să influențeze biofilmul și să îl penetreze.

Pentru a determina agentul patogen, pentru a-l izola în cultură pură, se efectuează semănatul. În timpul studiului, se efectuează mai multe semănături în diverse medii nutritive. Apoi, se izolează o cultură pură, se determină apartenența sa biologică și se stabilește sensibilitatea la medicamentele antibacteriene. Se selectează concentrația optimă.

Orice material biologic poate fi utilizat pentru studiu, în funcție de boală și localizarea procesului infecțios. Durata este determinată de rata de creștere a microorganismelor.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Testul de sensibilitate la scaun

Scaunul este examinat în diverse boli gastrice și intestinale, în caz de suspiciunea unui proces infecțios, intoxicație bacteriană, toxiinfecție alimentară. Scopul studiului este de a izola agentul patogen și de a selecta medicamente antibacteriene optime pentru acesta, care vor avea o activitate ridicată. Importanța acestui tip de studiu constă în faptul că este posibilă selectarea unui medicament care va acționa doar asupra agentului patogen și nu va afecta reprezentanții microflorei normale.

Prima și foarte importantă etapă este colectarea materiilor fecale. Acestea trebuie colectate într-un recipient steril special dimineața. Trebuie păstrate cel mult 1-2 ore. Femeile cu flux menstrual ar trebui să amâne analiza până la sfârșit, deoarece acuratețea rezultatelor se va modifica. Materialul este livrat la laborator pentru testare. Analiza se efectuează folosind tehnici microbiologice standard de însămânțare și izolare a unei culturi pure. De asemenea, se efectuează o antibiogramă. Pe baza concluziilor, se elaborează recomandări și se stabilește o schemă de studiu suplimentară.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Analiza disbacteriozei cu sensibilitate

Materialul pentru studiu îl reprezintă fecalele prelevate imediat după actul de defecare. Microflora normală a tractului gastrointestinal este formată din reprezentanți ai florei normale și mai mulți reprezentanți ai florei patogene. Compoziția, cantitatea și raportul dintre specii sunt strict definite și sunt menținute în limitele admise. Dacă acest raport este perturbat, se dezvoltă disbacterioza. Aceasta se poate manifesta în diferite moduri. Bolile infecțioase se pot dezvolta dacă cantitatea microflorei patogene crește brusc. Dacă cantitatea oricărui microorganism scade brusc, spațiul liber este ocupat de alți reprezentanți care nu sunt tipici tractului gastrointestinal sau sunt patogeni. Adesea, spațiul liber este ocupat de o ciupercă, apoi se dezvoltă diverse infecții fungice și candidoză.

Pentru a determina compoziția cantitativă și calitativă a microflorei intestinale, se efectuează o analiză a scaunului pentru disbacterioză. În mod convențional, toți reprezentanții care trăiesc în intestin sunt împărțiți în trei grupe: patogeni, oportuniști și nepatogeni. În consecință, analiza constă în trei părți. Fiecare grup de microorganisme are propriile nevoi de sursă de hrană și energie. Fiecare grup necesită medii nutritive separate și aditivi selectivi.

Mai întâi se efectuează microscopia și însămânțarea primară. Apoi, după însămânțare, se selectează cele mai mari colonii, similare ca trăsături morfologice cu reprezentanții fiecărui grup. Acestea sunt transferate în medii selective. După ce microorganismele au crescut, acestea sunt identificate și testate imediat pentru sensibilitatea la antibiotice. Se utilizează metode microbiologice standard.

Studiul unui grup de microorganisme patogene, pe lângă studiile standard, implică determinarea bacteriilor tifoide, paratifoide și dizenteriozei. De asemenea, se stabilește dacă o persoană este purtătoare a acestor microorganisme. Un studiu cuprinzător pentru disbacterioză include și un studiu al reprezentanților grupului bifidobacteriilor și lactobacililor. Studiul durează aproximativ o săptămână și depinde de rata de creștere a microorganismelor.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Testarea sensibilității la bacteriofagi

În cazul infecțiilor intestinale, bacteriofagii sunt adesea utilizați pentru tratament în locul antibioticelor. Bacteriofagii sunt virusuri bacteriene care sunt sensibile doar la aceștia. Aceștia găsesc o bacterie cu care sunt complementari, o penetrează și distrug treptat celula bacteriană. Drept urmare, procesul infecțios se oprește. Dar nu toate bacteriile sunt sensibile la bacteriofagi. Pentru a verifica dacă un anumit bacteriofag va manifesta activitate față de reprezentanții microflorei, trebuie efectuată o analiză.

Materialul pentru studiu sunt fecalele. Analiza trebuie livrată la laborator în decurs de o oră, altfel va fi imposibil de efectuat. Este necesar să se efectueze analiza în mai multe repetări. Metoda inițială este similară cu cea pentru determinarea sensibilității la antibiotice. Mai întâi, se efectuează o microscopie preliminară a probei, apoi se însămânțează primar pe medii nutritive universale. Apoi, se izolează o cultură pură pe medii nutritive selective.

Lucrul principal se face cu cultură pură. Acestea sunt tratate cu diferite tipuri de bacteriofage. Dacă colonia se dizolvă (lizează), aceasta indică o activitate ridicată a bacteriofagului. Dacă liza este parțială, bacteriofag funcționează moderat. În absența lizei, putem vorbi despre rezistență la bacteriofag.

Avantajul terapiei fagice este că bacteriofagii nu afectează organismul uman și nu provoacă efecte secundare. Aceștia se atașează de anumite tipuri de bacterii și le lizează. Dezavantajul este că sunt foarte specifici și au un efect selectiv și nu se pot atașa întotdeauna de bacterii.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Analiza sputei pentru sensibilitatea la antibiotice

Analiza este un studiu al secrețiilor din tractul respirator inferior. Scopul este de a determina tipul de microorganisme care acționează ca agent cauzal al bolii. De asemenea, se efectuează o antibiogramă. În acest caz, se determină sensibilitatea agentului patogen la antibiotice și se selectează concentrația optimă. Se utilizează pentru bolile tractului respirator.

Examinarea sputei și a altor organe din plămâni și bronhii este necesară pentru alegerea unui regim de tratament și pentru diferențierea diferitelor diagnostice. Este utilizată pentru a confirma sau infirma prezența tuberculozei.

În primul rând, este necesar să se obțină material biologic. Acesta poate fi obținut prin tuse, prin expectorație sau prin prelevarea acestuia din trahee în timpul bronhoscopiei. Există aerosoli speciali care promovează expectorația. Înainte de a recolta spută, gura trebuie clătită cu apă, ceea ce va reduce gradul de contaminare bacteriană a cavității bucale. Mai întâi, se recomandă să se respire adânc de 3 ori și să se producă o tuse productivă. Sputa poate fi, de asemenea, recoltată prin aspirație din trahee. În acest caz, se introduce un cateter special în trahee. În timpul bronhoscopiei, se introduce un bronhoscop în cavitatea bronșică. În acest caz, membrana mucoasă este lubrifiată cu un anestezic.

Materialul este apoi trimis la laborator pentru testare. Se efectuează însămânțare standard și microscopie. Apoi se izolează o cultură pură și se efectuează manipulări suplimentare cu aceasta. Se efectuează o antibiogramă, care permite identificarea spectrului de sensibilitate bacteriană și selectarea dozajului optim.

Dacă se suspectează tuberculoza, sputa de dimineață se examinează timp de trei zile. La testarea pentru tuberculoză, rezultatul va fi gata în 3-4 săptămâni. Deoarece mycobacterium tuberculosis, care este agentul cauzal al bolii, crește foarte lent.

În mod normal, ar trebui detectați reprezentanți ai microflorei normale a tractului respirator. De asemenea, este necesar să se țină cont de faptul că, odată cu imunitatea redusă, indicatorii microflorei normale pot diferi.

Analiza spermei pentru sensibilitatea la antibiotice

Este un studiu bacteriologic al ejaculatului spermatozoizilor, cu selecția ulterioară a antibioticelor sensibile și a concentrațiilor acestora. Cel mai adesea se efectuează în tratamentul infertilității și al altor boli ale sistemului reproducător masculin. În cazul în care boala este însoțită de un proces infecțios. Principala cauză a infertilității masculine este, în majoritatea cazurilor, o infecție. De obicei, se efectuează inițial o spermogramă. Pe baza rezultatelor, se stabilește capacitatea de fertilizare a spermatozoizilor. Dacă în această analiză se găsește un număr mare de leucocite, putem vorbi despre un proces inflamator. În acest caz, de obicei se prescrie imediat o analiză microbiologică, deoarece inflamația este aproape întotdeauna însoțită de o infecție. Pe baza rezultatelor obținute, se selectează terapia adecvată. Studiul este de obicei prescris de un androlog.

Prostatita și bolile venerice sunt, de asemenea, motive pentru efectuarea analizei. De asemenea, este prescrisă dacă se detectează o boală venerică la partener.

Baza unei analize corecte este, în primul rând, colectarea corectă a materialului biologic. Materialul este colectat în vase speciale cu gât larg. Temperatura de depozitare trebuie să corespundă temperaturii corpului uman. În acest caz, materialul poate fi păstrat cel mult o oră. În formă congelată, poate fi păstrat cel mult o zi. Este inadecvat să se recolteze o cultură în timpul administrării antibioticelor, deoarece acest lucru modifică tabloul clinic. De obicei, cultura se recoltează înainte de începerea tratamentului cu antibiotice. Sau întrerupeți administrarea medicamentelor cu 2-3 zile înainte de analiză.

Apoi se seamănă pe un mediu nutritiv. Se incubează într-un termostat timp de 1-2 zile. După aceea, se izolează o cultură pură, apoi se efectuează identificarea, se determină sensibilitatea, precum și tipul și rata de creștere a fiecărei colonii. Sensibilitatea la antibiotice se determină dacă se detectează microorganisme patogene. În medie, analiza durează 5-7 zile.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Testul de sensibilitate la gluten

Există numeroase teste care pot fi utilizate pentru a determina sensibilitatea imunologică la diverse substanțe sau agenți patogeni. Anterior, principala metodă era efectuarea testelor bazate pe reacția de aglutinare a anticorpilor și antigenelor. Astăzi, aceste teste sunt utilizate din ce în ce mai puțin, deoarece sensibilitatea lor este mult mai mică decât la multe metode moderne, cum ar fi testele pentru gluten. Cel mai adesea, în practică, se recurge la un test salivar pentru analiza glutenului și a scaunului.

Testul de sensibilitate la gluten este utilizat pentru diagnosticarea diverselor afecțiuni intestinale. Se bazează pe reacția sistemului imunitar. Dacă se adaugă gluten în scaun, reacția apare sau este absentă. Acesta este considerat un rezultat fals pozitiv sau fals negativ. Un rezultat pozitiv indică o predispoziție la colită, o probabilitate mare de dezvoltare a acesteia. De asemenea, confirmă boala celiacă.

De asemenea, este posibil să se efectueze un test de gluten folosind saliva ca material biologic. Este posibil să se măsoare cantitatea de anticorpi anti-gliadină. Un rezultat pozitiv indică sensibilitate la gluten. Aceasta poate indica o probabilitate mare de diabet. Dacă ambele teste sunt pozitive, se poate confirma diabetul sau boala celiacă.

[ 44 ], [ 45 ]

Testul de sensibilitate la chlamydia la antibiotice

Analiza se efectuează în tratamentul bolilor infecțioase și inflamatorii ale tractului urogenital, dacă se suspectează chlamydia. Materialul pentru studiu este un frotiu din mucoasa vaginală - la femei, un frotiu din uretră - la bărbați. Colectarea se efectuează în sala de operație folosind echipament de unică folosință. Este important să se mențină sterilitatea. Înainte de recoltarea materialului, trebuie să vă abțineți de la intimitate cu 1-2 zile înainte de începerea studiului. Dacă o femeie are menstruație, materialul se recoltează la 3 zile după încheierea completă a acestuia.

Materialul este livrat la laborator. O analiză completă include o microscopie preliminară a frotiului. Aceasta face posibilă determinarea vizuală a microflorei prin caracteristici morfologice și selectarea corectă a mediilor nutritive. Conținutul de mucus, puroi și particule epiteliale poate indica direct sau indirect dezvoltarea unui proces inflamator sau a degenerării maligne a celulelor.

Apoi, se efectuează însămânțarea primară. Cultura este incubată timp de câteva zile într-un termostat, iar identificarea se face pe baza caracteristicilor culturale. Apoi, cultura este transferată în medii nutritive selective destinate cultivării chlamidiei. Coloniile rezultate sunt identificate folosind teste biochimice. Apoi, sensibilitatea la antibiotice este determinată folosind metode standard. Se selectează cel mai sensibil antibiotic și concentrația acestuia. Pentru cultivarea chlamidiei sunt necesare medii speciale dezvoltate special pentru acest tip de microorganism, care conțin toate substanțele și factorii de creștere necesari.

De asemenea, este posibil să se efectueze un studiu folosind o metodă biologică. Pentru a realiza acest lucru, șobolanii sunt infectați cu agentul patogen. În unele laboratoare, în loc de șobolani, se utilizează o cultură de țesuturi special cultivate. Acest lucru se datorează faptului că chlamydia este un parazit intracelular și sunt necesare condiții speciale pentru cultivarea lor. Apoi, microorganismele sunt determinate folosind metoda PCR. Pentru a determina sensibilitatea, acestea sunt transplantate pe un mediu nutritiv selectiv pentru chlamydia, iar după câteva zile, rezultatele sunt înregistrate. Rezistența sau sensibilitatea se evaluează prin suprimarea procesului infecțios din celule.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Cât durează efectuarea unui test de sensibilitate la antibiotice?

În medie, analiza se efectuează în 5-7 zile. Unele analize durează mai mult. De exemplu, atunci când se diagnostichează tuberculoza, trebuie să așteptați rezultatele de la 3 săptămâni la o lună. Totul depinde de rata de creștere a microorganismelor. Adesea, personalul de laborator trebuie să se ocupe de cazuri în care pacienții solicită ca analiza să fie efectuată mai rapid. Și chiar oferă „plată suplimentară” pentru urgență. Totuși, aici trebuie să înțelegeți că, în acest caz, nimic nu depinde de acțiunile asistentului de laborator. Depinde doar de cât de repede crește microorganismul. Fiecare tip are propria rată de creștere, strict definită.

Performanță normală

Nu există valori normative universale absolute pentru toate analizele. În primul rând, aceste valori pot diferi pentru fiecare biotop. În al doilea rând, ele sunt individuale pentru fiecare microorganism. Adică, valorile normative pentru același microorganism, să zicem, pentru gât și intestine, sunt diferite. Deci, dacă stafilococul predomină în gât ca reprezentant al microflorei normale, atunci E. coli, bifido- și lactobacteriile predomină în intestine. Valorile pentru același microorganism în biotopi diferite pot diferi, de asemenea, semnificativ. De exemplu, Candida poate fi în mod normal prezentă într-o anumită cantitate în microflora urogenitală. În mod normal, aceasta nu este prezentă în cavitatea bucală. Prezența Candidei în cavitatea bucală poate indica introducerea artificială a acesteia din habitatul său natural.

Urina, sângele, lichidul cefalorahidian sunt medii biologice care în mod normal ar trebui să fie sterile, adică să nu conțină microfloră. Prezența microflorei în aceste fluide indică un proces inflamator, infecțios puternic și, de asemenea, indică riscul de a dezvolta bacteriemie și sepsis.

În general, există o clasificare aproximativă. Unitatea de măsură în microbiologie este UFC/ml, adică numărul de unități formatoare de colonii într-un mililitru de fluid biologic. Gradul de contaminare este determinat de numărul de UFC și variază într-un interval larg de la 10 ^{^1} la 10^ ⁹. În consecință, 10^ ¹ este numărul minim de microorganisme, 10^ ⁹ este un grad sever de infecție. În același timp, intervalul de până la 10 ^{^3} este considerat normal, toți indicatorii peste acest număr indicând reproducerea patologică a bacteriilor.

În ceea ce privește sensibilitatea la antibiotice, toate microorganismele sunt împărțite în rezistente, moderat sensibile și sensibile. Acest rezultat este adesea exprimat ca o caracteristică calitativă care indică MID - doza minimă inhibitorie de antibiotic, care inhibă totuși creșterea microorganismului. Pentru fiecare persoană, precum și pentru fiecare microorganism, acești indicatori sunt strict individuali.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Dispozitivul pentru analiză

Atunci când se efectuează studii bacteriologice, în special pentru determinarea sensibilității la antibiotice, un singur dispozitiv nu va fi suficient. Este necesară o dotare completă, cuprinzătoare a laboratorului bacteriologic. Este necesar să se planifice și să se selecteze cu atenție echipamente care să corespundă fiecărei etape a cercetării. În etapa de colectare a materialului biologic, sunt necesare instrumente sterile, cutii, cutii, recipiente, camere de depozitare și echipamente de transport pentru livrarea materialului la laborator.

În laborator, în primul rând, veți avea nevoie de un microscop de înaltă calitate pentru microscopia cu frotiu. Astăzi, există un număr mare de microscoape care au o varietate de proprietăți - de la microscoapele tradiționale cu lumină la microscoapele cu contrast de fază și forță atomică. Echipamentele moderne vă permit să scanați o imagine în spațiul tridimensional și să o examinați la o mărire mare cu o precizie ridicată.

În etapa de însămânțare și incubare a microorganismelor, pot fi necesare autoclave, dulapuri termice uscate, desicatoare, băi de abur și o centrifugă. Este necesar un termostat, în care are loc incubarea principală a materialului biologic.

În etapa de identificare a microorganismelor și efectuarea unei antibiograme, pot fi necesare micromanipulatoare, spectrometre de masă, spectrofotometre, colorimetre pentru diverse calcule și evaluarea proprietăților biochimice ale culturilor.

În plus, laboratoarele moderne pot fi dotate cu echipamente de înaltă tehnologie care efectuează toate etapele principale de cercetare menționate mai sus, până la calcularea rezultatelor în mod automat. Astfel de dispozitive includ, de exemplu, un dispozitiv complex de laborator bacteriologic bazat pe un spectrometru de masă cu timp de zbor. Această linie de dispozitive face posibilă împărțirea întregului teritoriu al laboratorului în trei zone. Prima zonă este cea murdară, unde se primesc și se înregistrează testele. A doua zonă este zona de lucru, unde se desfășoară efectiv principala cercetare microbiologică. Iar a treia zonă este sterilizarea și autoclava, unde se efectuează pregătirea și eliminarea materialului de lucru.

Modelele permit incubarea la o gamă largă de temperaturi și condiții. Conține un analizor încorporat de sânge și alte probe biologice, care produce rezultate cu precizie și fiabilitate ridicată. Kitul include cântare electronice, bidistilere, centrifuge, autoclave și hote de sterilizare, aparat automat de gătit mediu, baie de apă cu agitator încorporat, pH-metre, termometre și microscoape.

De asemenea, se utilizează un analizor microbiologic, în care se introduc probele care urmează să fie testate, mediile nutritive și seturile de teste pentru determinarea sensibilității. Aparatul efectuează studiile necesare și emite o concluzie gata făcută.

Creșterea și scăderea valorilor

Doar un medic poate descifra analiza. Dar adesea, pacienții, după ce primesc rezultatele, intră în panică, observând un număr mare de simboluri și numere de neînțeles. Pentru a nu se rătăci, este recomandabil să aveți cel puțin o idee generală despre cum să descifrați analiza sensibilității la antibiotice. De obicei, primul element din rezultate indică numele microorganismului care este agentul cauzal al bolii. Numele este dat în latină. Poate indica, de asemenea, un reprezentant al microflorei normale care predomină în organism, deci nu este nevoie să intrați în panică. Al doilea element indică gradul de însămânțare, adică numărul de microorganisme. De obicei, acest număr variază de la 10⁻¹ ^la 10⁻¹ ^. Al treilea element indică forma de patogenitate, iar al patrulea - numele medicamentelor antibacteriene la care acest microorganism este sensibil. Concentrația minimă inhibitorie, la care creșterea microorganismului este suprimată, este indicată în apropiere.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]