Agregarea plachetară cu ristocetină (factor von Willebrand )

Valorile de referință (norma) ale activității factorului von Willebrand sunt 58-166%.

Factorul von Willebrand este sintetizat de celulele endoteliale și megacariocite. Este necesar pentru aderența plachetară normală și are capacitatea de a prelungi timpul de înjumătățire al factorului VIII. Factorul VIII de coagulare plasmatică - globulina antihemofilă A - circulă în sânge ca un complex de trei subunități denumite VIII-k (unitatea de coagulare), VIII-Ag (principalul marker antigenic) și VIII-vWF (factorul von Willebrand asociat cu VIII-Ag). Se crede că factorul von Willebrand reglează sinteza părții de coagulare a globulinei antihemofile A (VIII-k) și este implicat în hemostaza vasculo-plachetară.

Boala von Willebrand este o afecțiune ereditară caracterizată prin creșterea timpului de sângerare, scăderea activității cofactorului ristocetin și scăderea (în grade diferite) a activității coagulante a factorului VIII. Manifestările clinice ale bolii sunt similare cu cele ale trombocitopatiei. Cu toate acestea, pacienții cu o activitate semnificativ scăzută a factorului VIII pot prezenta hematoame și hemartroză.

Pe baza studiilor de laborator care ne permit să determinăm structura și activitatea factorului von Willebrand, se disting următoarele forme ale bolii.

• Tipul I (70% din toate cazurile) se caracterizează printr-o ușoară scădere a cofactorului ristocetinei (factorul von Willebrand) și a activității coagulante (VIII-k) cu o structură macromoleculară normală a factorului von Willebrand.
• Tipul II: se bazează pe o deficiență selectivă a polimerilor cu greutate moleculară mare ai factorului von Willebrand, din cauza unor perturbări ale structurii acestei proteine.
  • Tipul IIB este cauzat de interacțiunea crescută dintre factorul von Willebrand și trombocite, iar clearance-ul crescut al agregatelor plachetare duce la trombocitopenie.
• Tipul III este caracterizat printr-un deficit cantitativ sever al factorului von Willebrand, rezultând o scădere semnificativă clinic a activității factorului VIII (VIII-k).

Conținutul factorului von Willebrand se determină în cazurile în care timpul de sângerare este crescut, numărul de trombocite se încadrează în valorile de referință și nu există cauze evidente ale disfuncției plachetare. Pentru a evalua factorul von Willebrand, se determină conținutul cantitativ al factorului von Willebrand (un studiu al activității cofactorului ristocetină), se studiază aglutinarea plachetară indusă de ristocetină și structura antigenică a factorului von Willebrand asociat cu factorul VIII (VIII-vWF).

Determinarea agregării plachetare cu ristocetină în plasmă este utilizată pentru evaluarea cantitativă a factorului von Willebrand. A fost stabilită o relație liniară între gradul de agregare a ristocetinei și cantitatea de factor von Willebrand. Metoda se bazează pe capacitatea acestui antibiotic (ristocetină) de a stimula interacțiunea in vitro a factorului von Willebrand cu glicoproteina plachetară Ib. În majoritatea cazurilor de boală von Willebrand, se observă o agregare afectată a ristocetinei cu un răspuns normal la ADP, colagen și adrenalină. Agregarea afectată a ristocetinei este detectată și în trombodistrofia macrocitară Bernard-Soulier (absența receptorilor de agregare a ristocetinei pe membrana plachetară). Pentru diferențiere, se utilizează un test cu adăugarea de plasmă normală: în boala von Willebrand, agregarea ristocetinei se normalizează după adăugarea de plasmă normală, în timp ce acest lucru nu se întâmplă în sindromul Bernard-Soulier.

Studiul poate fi utilizat și în diagnosticul diferențial al hemofiliei A (deficit de factor VIII) și al bolii von Willebrand. În hemofilie, conținutul de VIII-k este redus drastic, iar conținutul de VIII-fB se încadrează în intervalul normal. Clinic, această diferență se manifestă prin faptul că în hemofilie apare un tip de hematom cu sângerare crescută, iar în boala von Willebrand, un tip de hematom peteșial.

Aglutinarea plachetară indusă de ristocetină este redusă în majoritatea cazurilor de boală von Willebrand, cu excepția tipului IIB.

Structura antigenică a factorului von Willebrand asociat cu factorul VIII (VIII-vWF) este detectată prin diverse metode imunologice, iar distribuția factorului von Willebrand în funcție de dimensiunea moleculară este determinată prin electroforeză pe gel de agaroză. Aceste teste sunt utilizate pentru a stabili tipul de boală von Willebrand.

Studiul agregării plachetare cu diverși inductori este efectuat nu doar pentru a identifica tulburările funcțiilor de agregare plachetară. Acest studiu permite evaluarea eficacității terapiei antiplachetare, selectarea dozelor individuale de medicament și monitorizarea medicamentelor.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]