Agentul cauzal al tularemiei

Tularemia este o boală primară a animalelor (rozătoarelor), la om apare ca o boală infecțioasă acută cu un tablou clinic variat și recuperare lentă. Agentul cauzal al tularemiei - Francisella tularensis - a fost descoperit de G. McCoy și S. Chapin în 1912 în timpul unei epizootii la veverițele de pământ din zona Lacului Tulare (California), studiată în detaliu de E. Francis, în onoarea căruia este numit genul.

Acestea sunt tije polimorfe foarte mici, cu dimensiuni de 0,2-0,7 µm, coccoide sau elipsoide, care foarte des dau o colorare bipolară atunci când se utilizează metode speciale de colorare; sunt nemotile, gram-negative, nu formează spori; catalază-negative, formează H2S, aerobe stricte, temperatura optimă pentru creștere este de 37 °C, pH 6,7-7,2. Tulpinile virulente au o capsulă, formează acid fără gaz în timpul fermentării unor carbohidrați (glucoză, maltoză, manoză, fructoză, dextrină), gradul de fermentație variază între tulpini, conținutul de G + C în ADN este de 33-36% mol. F. tularensis nu crește pe medii obișnuite. G. McCoy și Sh. Chapin au folosit un mediu cu gălbenuș coagulat. Pe acesta, bacilul tularemiei crește sub formă de colonii mici și delicate, asemănătoare picăturilor de rouă, apoi cultura capătă caracterul unui înveliș delicat de culoarea șagrenului, cu o consistență mucoasă slab exprimată. E. Francis a propus agar nutritiv pentru creșterea bacilului tularemic, conținând 0,05-0,1% cistină, 1% glucoză și 5-10% sânge. Pe un astfel de mediu, creșterea este mai luxuriantă și rugoasă: coloniile sunt rotunde cu o suprafață netedă, de culoare lăptoasă, umede, cu o consistență mucoasă, înconjurate de un halou verde caracteristic. Creșterea este lentă, coloniile ating dimensiunea maximă în ziua 3-5 (1 - 4 mm). Bacteriile tularemice se reproduc bine în sacul vitelin al unui embrion de pui, provocând moartea acestuia în ziua 3-4.

Următorii aminoacizi sunt necesari pentru creșterea F. tularensis: arginină, leucină, izoleucină, lizină, metionină, prolină, treonină, histidină, valină, cistină, pentru unele subspecii - serină, tirozină, acid aspartic; în plus, pentru creștere au nevoie și de acid pantotenic, tiamină și ioni de Mg2. Având în vedere aceste caracteristici, mediile sintetice pot fi utilizate pentru cultivarea F. tularensis.

Genul Francisella aparține clasei Gammaproteobacteria, încrengătura Proteobacteria. Acest gen include și F. novicida, a cărei patogenitate pentru oameni nu a fost stabilită.

Agentul cauzal al tularemiei este un parazit intracelular. Virulența sa se datorează unei capsule care inhibă fagocitoza; neuraminidazei, care promovează aderența; endotoxinei; proprietăților alergenice ale peretelui celular, precum și capacității de a se reproduce în fagocite și de a suprima efectul lor ucigaș. Mecanismele virulenței nu au fost încă descifrate. În plus, în bacilul tularemiei au fost găsiți receptori capabili să interacționeze cu fragmentele Fc ale imunoglobulinelor IgG. Ca urmare a acestei legări, activitatea sistemelor complementului și a macrofagelor este perturbată.

F. tularensis în forma S (virulentă) are două antigene - O și Vi (antigen capsular). Antigenul O este înrudit cu antigenele Brucellae. Disocierea S->SR->R duce la pierderea capsulei, la virulență și imunogenitate. Specia F. tularensis este împărțită în trei rase geografice (subspecii):

• Holarctic (scăzut patogen pentru iepurii domestici, nu fermentează glicerolul și nu are enzima citrulin ureidază, întâlnită în țările din emisfera nordică);
• Asia Centrală (scăzut patogen pentru iepuri, are citrulin ureidază și fermentează glicerolul);
• Nearctic (american), mai patogen pentru iepuri, fermentează glicerolul, are citrulin ureidază.

În plus, tulpinile subspeciei americane și centrale din Asia au activitate fosfatazică, care este absentă în tulpinile subspeciei holarctice.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Rezistența agentului cauzator al tularemiei

F. tularensis este destul de stabil în mediul extern, mai ales dacă este prezent în material patologic. În furaje, cereale, contaminate cu excremente de rozătoare bolnave, supraviețuiește până la 4 luni; în apă - până la 3 luni; în gheață - mai mult de 1 lună. Este sensibil la lumina directă a soarelui (moare în 30 de minute), temperaturi ridicate (la 60 °C moare în 10 minute), sub influența soluției de lizol 3%, alcool 50%, formalină și alte antiseptice moare în 5-10 minute.

Epidemiologia tularemiei

Principalul rezervor de tularemie în natură sunt rozătoarele, printre care se observă epizootii în condiții naturale. Oamenii se infectează doar de la animale; agentul patogen nu se transmite de la persoană la persoană. Agentul patogen a fost găsit la 82 de specii de rozătoare și lagomorfe și se găsește cel mai adesea la reprezentanții a 4 familii: rozătoare asemănătoare șoarecilor (Muridae), iepuri de câmp (Leporidae), veverițe (Sciuridae) și jerboa (Dipodidae). În Rusia, principalii purtători sunt rozătoarele asemănătoare șoarecilor: șobolani de apă, șoareci de câmp, șoareci de casă și bizami.

În funcție de sensibilitatea lor la tularemie, animalele pot fi împărțite în patru grupe:

• Grupa 1 - cei mai sensibili (șoareci de câmp, șobolani de apă, șoareci de casă, șoareci albi, cobai și alții). Doza letală minimă este o celulă microbiană;
• Al doilea grup - mai puțin sensibil (șobolani gri, popândăi etc.). Doza letală minimă este de 1 miliard de celule microbiene, însă o celulă microbiană este suficientă pentru a infecta unele dintre ele;
• Al treilea grup (prădători - pisici, vulpi, dihori). Rezistent la doze infecțioase mari, boala evoluează fără manifestări vizibile;
• Grupa 4 - imun la tularemie (ungulate, animale cu sânge rece, păsări).

Pentru oameni, doza minimă infecțioasă este o celulă microbiană. Oamenii se pot infecta în toate modurile posibile: prin contact direct și indirect cu rozătoare bolnave, cadavrele acestora sau obiecte infectate cu rozătoare; prin contact alimentar (prin consumul de alimente și apă infectate cu rozătoare), praf din aer și prin transmitere. Infecția cu bacteria tularemie a fost stabilită la 77 de specii de artropode hematopode. De o importanță deosebită sunt căpușele ixodide, la care agentul patogen persistă pe tot parcursul vieții și este chiar transmis transovarian la urmași. Aceste circumstanțe contribuie la stabilirea bolii în natură. Oamenii se infectează cu căpușe nu prin mușcături, ci ca urmare a faptului că agentul patogen ajunge pe piele împreună cu excrementele căpușei.

În Rusia, există 7 tipuri principale de peisaje cu focare naturale de tularemie: mlaștină, pajiște, stepă, pădure, pârâu de poale, tundră și tugai (deșert).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Simptomele tularemiei

Agentul cauzal al tularemiei pătrunde în organism prin învelișurile exterioare (pielea și mucoasele deteriorate și intacte). Ulcerele se formează adesea la locul penetrării. Prin vasele limfatice, bacteriile intră în ganglionul limfatic regional și se înmulțesc liber în acesta; procesul inflamator duce la formarea unui bubon. De aici, agentul patogen pătrunde în sânge, bacteriemia provoacă generalizarea procesului, diverse organe și țesuturi sunt implicate în ea, proliferarea bacteriilor în care duce la formarea de granuloame și ulcere necrotice. Restructurarea alergică a organismului este asociată cu bacteriemia și generalizarea. Perioada de incubație a tularemiei variază de la 2 la 8 zile. Boala debutează acut: apar febră, dureri de cap, dureri musculare, hiperemie facială. Evoluția ulterioară depinde de locul porții de intrare, în funcție de care se disting următoarele forme clinice de tularemie: ulcero-glandulară (bubonică), oculo-glandulară, angino-glandulară, abdominală și pulmonară. Mortalitatea în tularemie nu depășește 1-2%.

Imunitatea postinfecțioasă este puternică, persistentă, în majoritatea cazurilor pe tot parcursul vieții, are natură celulară, este cauzată în principal de limfocite T și macrofage, într-o măsură mai mică - de anticorpi. Fagocitoza la persoanele cu imunitate este completă.

Diagnosticul de laborator al tularemiei

Toate metodele microbiologice sunt utilizate pentru diagnosticarea tularemiei. Studiul se desfășoară în laboratoare securizate. Materialul pentru studiu - sânge, puncție bubon, razuire ulceroasă, secreții conjunctivale, placă faringiană, spută etc. - este determinat de forma clinică a bolii. În plus, pentru studiu se pot lua apă și produse alimentare. În focarele naturale de tularemie, se efectuează studii sistematice planificate pentru a izola agentul cauzal al tularemiei de la rozătoare.

Metoda bacteriologică de diagnosticare a tularemiei la om dă rareori rezultate pozitive. O cultură pură este de obicei izolată după acumularea acesteia pe animale de laborator sensibile. Șoarecii albi și cobaii sunt utilizați pentru bioteste. Șoarecii sunt infectați subcutanat, cobaii - intraperitoneal; animalele mor în ziua 3-6, uneori după brumă. Animalele infectate sunt ținute în condiții speciale (cum ar fi în diagnosticarea ciumei) și observate timp de 6-14 zile. Animalele de experimentare nu mor timp de 7-15 zile, sunt sacrificate în ziua 15-20, iar cadavrele sunt autopsiate. În prezența tularemiei, se detectează modificări patologice și anatomice sub forma unui proces productiv cu necroză. O cultură pură este izolată din organele interne pe un mediu de gălbenuș, concentrație sanguină de glucoză-cisteină etc. Identificarea se bazează pe morfologia și proprietățile tinctoriale ale agentului patogen, absența creșterii pe MPA și aglutinarea cu ser omolog. Patogenitatea pentru șoarecii albi și cobaii este determinată. O cultură pură poate fi izolată prin infectarea embrionilor de pui de 12 zile și a sacului vitelin. Pentru a izola o cultură pură a agentului patogen din apă, aceasta este centrifugată sau filtrată prin filtre bacteriene, iar sedimentul este utilizat pentru infectarea animalelor de laborator. Atunci când se studiază produsele alimentare, acestea sunt spălate cu MP B, centrifugate, iar sedimentul este utilizat pentru infectarea animalelor de laborator.

Simultan cu examenul bacteriologic, din materialul studiat se prepară frotiuri-amprente și se colorează conform Romanovsky-Giemsa. În frotiurile de la organe se pot detecta bacterii mici cocoide și în formă de baston, care sunt situate intracelular și sub formă de clustere, formând o capsulă delicată.

Pentru diagnostic, se utilizează o reacție de aglutinare detaliată, RPGA și RIF.

Testele alergice sunt utilizate pentru diagnosticarea precoce a tularemiei (începând cu a 5-a zi de la debutul bolii). Se utilizează două tipuri de tularine și, în consecință, se utilizează două metode de administrare a acestora: cutanată și intradermică. Deoarece concentrația alergenului în ambele tipuri de tularine este diferită, este inacceptabil să se utilizeze tularina cutanată pentru un test intradermic și invers. Rezultatele reacției alergice sunt luate în considerare dinamic după 24, 36, 48 de ore. Un infiltrat cu un diametru de cel puțin 5 mm este considerat un rezultat pozitiv. La persoanele vaccinate sau la cele care au avut tularemie, testele alergice rămân pozitive timp de mai mulți ani (reacție anamnestică).

Prevenirea specifică a tularemiei

Pentru prevenție specifică, se utilizează un vaccin împotriva tularemiei, obținut în 1930 de medicii militari ruși B. Ya. Elbert și N. A. Gaisky din tulpina Me 15. Vaccinul oferă o imunitate puternică timp de 5-6 ani la infectarea cu subspecii europene și holarctice și este eficient împotriva varietății americane a agentului patogen. Vaccinarea se efectuează conform indicațiilor epidemiologice, precum și pentru persoanele aparținând grupurilor de risc. Este permisă vaccinarea simultană împotriva tularemiei și brucelozei; tularemiei și ciumei, precum și împotriva tularemiei și a altor infecții.

Prevenirea nespecifică a tularemiei este aceeași ca și în cazul altor zoonoze și vizează în principal controlul rozătoarelor.